以下是關于羅氏LightCycler480適配八聯管的詳細說明,結合實驗操作要點和耗材特性進行整理:
一、八聯管的核心特性
材質與設計?
采用耐300℃高溫的聚丙烯材質,純度達99.9%,超薄均勻壁厚設計確保熱傳導效率,減少實驗循環時間?。
分為透明和乳白色兩種規格(如V1082-C透明管、V1082-M乳白管),乳白色管更適合熒光定量檢測,減少光散射干擾?。
兼容性?
專為LightCycler480設計,適配其溫控模塊和光學檢測系統,支持0.1ml和0.2ml兩種容量(如V2081-C 0.2ml透明管)?。
可配套無裙邊96孔板輔助器(貨號V-96AD),實現小通量實驗的靈活操作?。
二、使用流程與注意事項
實驗準備?
耗材選擇?:根據實驗需求選擇八聯管規格(如0.1ml用于低體積反應,0.2ml用于標準反應),確保管蓋密封性良好?。
輔助工具?:需搭配專用輔助器(如V-96AD棕色輔助器)固定八聯管,避免熱循環中移位?。
加樣與封蓋?
使用移液器精確分裝反應液(推薦體積10-100μL),避免氣泡產生,封蓋后離心數秒確?;旌暇鶆?。
若使用單數管,需用空管配平以保持儀器平衡?。
儀器操作?
在LightCycler480軟件中選擇對應程序,設置溫度參數(如預變性95℃ 10分鐘),注意選擇正確的耗材類型(八聯管或96孔板)?。
將八聯管對稱放入樣品槽,確保與溫控模塊緊密接觸,啟動前檢查熱蓋溫度(通常105℃)?。
三、常見問題與解決方案
信號異常?:若熒光值波動,檢查管蓋是否密封或是否存在冷凝水,建議更換乳白色管減少光學干擾?。
耗材變形?:高溫循環后若發現管體變形,需確認材質耐溫性(≤300℃)或避免超負荷使用?。
四、替代方案與擴展應用
國產兼容耗材?:部分廠商提供非原裝八聯管,價格更低但需驗證光學性能和熱傳導穩定性?。
高通量擴展?:需搭配384孔板(如V3841-M)時,建議使用原裝耗材以確保數據準確性?。
通過規范操作和耗材適配,可充分發揮LightCycler480的高靈敏度(檢測單拷貝基因)和快速循環(40分鐘完成40循環)優勢?。
注:以上資料僅供參考,完整操作請以實說明為準,不同品牌可能存在細節差異?。
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