知識分享:如何解凍血清才不會使產品質量受損?
?、?將血清從低溫冰箱取出后,先于2~8℃冰箱放置12-24小時左右使之部分溶解,然后在室溫下使之全溶;但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。
?、?切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中,無論室溫的水或者37℃的水;因為在水浴中血清迅速融化,過大的溫差變化(-20℃→37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清析出沉淀。
?、?血清應該置于-15℃以下保存;若一次無法用完一瓶,應該無菌分裝,再冷凍保存,避免反復凍融。
血清中可能出現的沉淀物是什么?
?、?纖維蛋白,它是經常出現的較大的沉淀物,可以達到1-2mm,可以用肉眼觀察到。
?、?磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現渾濁,并且在37℃培養的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經常被誤認為是微生物污染。
?、?膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質,它們也是血清中出現沉淀物的常見原因。關于細胞生長,我們的試驗以及經驗表明沉淀物不會影響細胞培養,我們的客戶以及其它血清生產商也證明了這一點。
血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400-600g離心5min,上清液即可加入培養基內一起培養。 我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,一方面它可能會阻塞您的過濾膜;另一方面,過濾血清這種行為可能會導致血清中部分營養成分的流失。
如何避免沉淀物的產生?
溫度過高、時間過久、搖晃不均勻等,都會造成沉淀增多;我們建議,如非必要,無須對血清進行滅活;若必須熱滅活,應嚴格遵守56℃、30min 的原則,并隨時搖晃均勻。
注:以上資料僅供參考,不同品牌產品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書?。
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