以下是?猴α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒?的實驗說明書核心內容整理,綜合多個高可信度來源: 一、實驗原理? 采用?雙抗體夾心法?: 用純化的猴IFN-α抗體包被微孔板,依次加入樣本、HRP標記的檢測抗體,形成復合物后通過TMB顯色,顏色深淺與IFN-α濃度正相關?。 二、試劑盒組成? 組件 規格/說明 預包被板 96孔板(12孔×8條)? 標準品 凍干粉(如480pg/ml),需稀釋液重構? HRP標記抗體 含檢測抗體、顯色劑A/B液、終止液? 濃縮洗滌液 30倍稀釋使用(需蒸餾水配制)? 輔助材料 封板膜、密封袋、說明書? 三、樣本處理? 血清/血漿? 室溫靜置后離心(2000-3000g,20分鐘),避免溶血或脂血?。 長期保存需-20℃,?避免反復凍融??。 組織勻漿? 用PBS(含蛋白酶抑制劑)勻漿后離心取上清,建議稀釋后檢測?。 四、操作步驟? 標準品稀釋? 梯度稀釋(如480→240→120→60→30→15 pg/ml),空白孔用稀釋液?。 加樣與孵育? 每孔加50μL樣本或標準品,37℃孵育30-60分鐘?。 洗滌? 手工洗板需拍干,重復5次;洗板機建議清洗5次?。 顯色與終止? 加TMB避光反應15分鐘,終止后15分鐘內測450nm OD值?。 五、注意事項? 環境控制?:顯色階段需避光,試劑使用前室溫平衡15-30分鐘?。 干擾物?:避免含NaN3的樣本(抑制HRP活性)?。 質量控制?:建議標準品和樣本做復孔,CV值應<15%?。 六、技術參數? 項目 參數范圍 檢測范圍 6.25-1000pg/ml(不同品牌有差異)? 靈敏度 通常<15pg/ml? 有效期 未開封2-8℃保存6個月,開封板條需密封防潮? 如需完整說明書或操作視頻,建議聯系供應商獲取隨貨文件?。 注:以上資料僅供參考,不同品牌產品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書?。 |